Ангиогенеза је физиолошки процес неоваскуларизације који се карактерише растом нових крвних судова из већ постојећих малих венула и артериола. Овај процес је регулисан равнотежом између про- и анти-ангиогених молекула, која настаје као природни одговор тела на исхемију у ткивима. Иако, саставни део нормалних процеса у организму, ангиогенеза је честа у бројним патолошким стањима као што су туморски раст и метастазирање, инфламаторне и васкуларне болести, повреде и ране. У туморима ниске диференцијације, васкуларна мрежа не може да испрати бујање малигног ткива и раст тумора који је превише интензиван. Услед брзог смањења pO₂, недостатка нутријената и других фактора у тумору се иницира „angiogenic switch“, након чега се ослобађају бројни фактори који индукују „клијање“ и хемотаксију, односно кретање ендотелних ћелија према туморској маси. У хипоксичним условима долази до стабилизације HIF-1α, који даље активира експресију вишеструких гена који доприносе процесу ангиогенезе.

Специфична Лабораторијска испитивања

1. Генска експресија биомаркера ангиогенезе: VEGF, CXCL-12, HIF-1, iNOS методом qPCR.
2. Протеинска експресија:
   • Одређивање концентрације ММP-9 колориметријском методом (ELISA)
   • Одређивање протеинске експресије VEGF и CXCR-4 методом Western blot и имунофлоресцентном микроскопском методом.
3. In vitro праћење цитотоксичних ефеката и параметара неоангиогенезе на имортализованим ћелијским линијама карцинома дојке,
   • Анализа цитотоксичних ефеката у реалном времену коришћењем Real Time Cell Analyzer – RTCA.
   • Одређивање параметара неоангиогенезе на имортализованим ћелијским линијама карцинома дојке: VEGF имунофлоресцентном микроскопском методом, као и ММP-9 колориметријском методом (ELISA).

Референце:

1. Цветковић Д (2017). Улога молекуларних механизама неоангиогенезе као тумор маркера у индивидуализацији терапије пацијената са карциномом дојке. Докторска дисертација. Природно-математички факултет, Универзитет у Крагујевцу, Крагујевац. 1-197.
2. Cvetković DM, Milošević BZ, Cvetković AM, Ninković SM, Jovankić JV, Dalibor V Jovanovic DV, Marković SD. The concentration of matrix metalloproteinase 9 in the tumor and peritumoral tissue as prognostic marker in breast cancer patients. Vojnosanitetski Pregled ISSN: 0042-8450. DOI: https://doi.org/10.2298/VSP170313118C
3. Cvetković DM, Živanović MN, Milutinović MG, Djukić TR, Radović MD, Cvetković AM, Filipović ND, Zdravković ND. Real-time monitoring of cytotoxic effects of electroporation on breast and colon cancer cell lines. Bioelectrochemistry 2017; 113: 85-94. ISSN: 1567-5394.
4. Filipovic ND, Djukic TR, Radovic MD, Cvetkovic DM, Curcic MG, Markovic SD, Peulic AS, Jeremic BM. Electromagnetic field investigation on different cancer cell lines. Cancer Cell International 2014; 14: 84. ISSN: 1475-2867.
5. Јованкић Јована. Молекуларни механизми редокс статуса здравих (MRC-5) и канцерозних (MDA-MB-231) ћелијских линија у антитуморском деловању екстраката инвазивних врста биљака (Robinia pseudoacacia и Amorpha fruticosa). Мастер рад, Природно-математички факултет, Универзитет у Крагујевцу. 2016. 1-106.